實(shí)驗(yàn)案例
2025/5/21 10:44:38
高壓均質(zhì)破鏈霉菌，蛋白提取新突破
來源：上海凈信
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實(shí)驗(yàn)背景：
#鏈霉菌與蛋白質(zhì)提取的挑戰(zhàn)
鏈霉菌(Streptomyces)是一類重要的工業(yè)微生物，廣泛用于抗生素(如鏈霉素)、酶制劑及生物活性物質(zhì)的合成。其菌絲體結(jié)構(gòu)致密、細(xì)胞壁厚(革蘭氏陽性菌)，導(dǎo)致胞內(nèi)蛋白質(zhì)的提取效率低，傳統(tǒng)破碎方法面臨以下痛點(diǎn)：
超聲波破碎：小規(guī)模處理效率低，易產(chǎn)熱導(dǎo)致蛋白變性;
酶解法：成本高、耗時長，且可能引入雜質(zhì);
珠磨法：設(shè)備損耗大，操作復(fù)雜，難以放大生產(chǎn)。
凈信高壓均質(zhì)機(jī)憑借超高壓剪切力與空穴效應(yīng)，可快速破碎鏈霉菌細(xì)胞壁，釋放胞內(nèi)蛋白，成為蛋白提取的首選方案!
高壓均質(zhì)機(jī) GSL-15
工作原理
高壓均質(zhì)的原理：
高壓泵頭組件工作時將物料經(jīng)過單向閥吸入泵腔，流體物料在柱塞的作用力下，泵腔和均質(zhì)閥座之間的物料會行形成極高的壓力。
高壓物料通過均質(zhì)閥組件時，產(chǎn)生以下三種均質(zhì)效應(yīng)：
① 剪切作用,均質(zhì)閥座與閥芯間的縫隙很小,對物料顆粒產(chǎn)生剪切
②空穴效應(yīng),高速擠出的物料瞬間失壓,最終達(dá)到使物料均勻分布目的
③ 碰撞作用,高速擠出的物料以極高的速度撞擊到碰撞環(huán)上,產(chǎn)生撞擊粉碎
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、 連接管路，打開主機(jī)及冷水機(jī)。
2、 排除液封液體、加入純水清洗管道
3、 加入樣品，等出料口出液后，進(jìn)行步進(jìn)式加壓至1000 bar 均質(zhì)3次。
4、 完成樣品均質(zhì)，出料口接料。
5、 加入純水清洗，并泄壓，直至純水清澈，加入無水乙醇，等待出料口出樣，停止主機(jī)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
樣品均質(zhì)前后效果圖
高壓均質(zhì)機(jī)的核心優(yōu)勢：
破碎效率高：單次處理幾分鐘內(nèi)完成，破碎率>90%，適合大規(guī)模生產(chǎn);
低溫：低溫循環(huán)系統(tǒng)避免蛋白熱變性，活性保留率>85%;
靈活適配：壓力可調(diào)，適配不同菌株的細(xì)胞壁強(qiáng)度;
低成本：無需耗材(如酶或研磨珠)，維護(hù)簡單，長期使用成本降低60%+。
注意事項(xiàng)：
1、 當(dāng)樣品折光率發(fā)生明顯變化時，便說明已經(jīng)完成了細(xì)胞破碎，請勿繼續(xù)破碎。
2、 使用超聲波破碎和高壓均質(zhì)機(jī)的破碎，由于原理和均質(zhì)效果的不同，在進(jìn)行液相檢測時兩項(xiàng)技術(shù)做出的蛋白峰是會有不同的。
